<B> 목적</B> 상황버섯(<I>Phellinus linteus </I>)은 생체 조절 기능을 가지는 버섯 가공 식품으로서 시판되고 있어 혈당치 상승 억제 작용등이 보고되고 있지만 조추출액을 이용한 연구이다.조추출액은 다성분이기 때문에 어떤 성분이 효과를 보이는지 확인되지 않았다.이번에 연구자들은 단백질의 기능성에 착안하여 암세포 증식 억제성분의 부분정제를 실시한 후 항종양 활성을 조사하였다.<BR><B>방법 </B>시료는 상황버섯 균사체의 추출물 성분을 열수 추출하여 건조한 분말이다.컬럼 크로마토그래피에 의한 정제는, 츠카모토등의 마늘의 렉틴 단백질의 정제법에 준했다.전기영동은 15% 폴리아크릴아미드겔을 이용해 SDS 전기영동을 하며, 영동 후에는 곰시브릴리언트블루(CBB)로 염색하였다.당질량 측정은 페놀황산법, 단백질량 측정은 롤리법 또는 280 nm의 흡광도에 따랐다.암세포증식억제시험은인간임파구계암세포U937을각단계의정제물로시간 의존적으로처리하고세포수를현미경아래에서측정함으로써비처리컨트롤군과의비교에서암세포증식억제효과를관찰하였다.<BR><B>제1단계정제는셀룰라아제처리,제2단계는세화덱스G-75컬럼크로마토G-75컬럼크로마토그래피,제3단계에서는암크로마토그래피,프랙션 넘버 20번까지는 인산완충액만으로 용출, 21번 이후에는 NaCl로 농도 구배를 통해 용출하고 단백질 피크에 대하여 SDS 전기영동 및 암세포 증식 억제시험을 실시했다.어느 피크나 암세포 증식 억제 효과를 보였지만 항종양 활성의 정도는 달랐다.
천풍농원
<B>目的</B>メシマコブ(<I>Phellinus linteus</I>)は生体調節機能を有するキノコ加工食品として市販されており、血糖値上昇抑制作用などが報告されているが粗抽出液を用いた研究である。粗抽出液は多成分であるため、どの成分が効果を示しているのか確認できていない。今回、演者らは蛋白質の機能性に着目し、癌細胞増殖抑制成分の部分精製を行った後、抗腫瘍活性を調べた。<BR><B>方法</B>試料は、メシマコブ菌糸体のエキス成分を熱水抽出し乾燥した粉末である。カラムクロマトグラフィーによる精製は、塚本らのニンニクのレクチン蛋白質の精製法に準じた。電気泳動は15％ポリアクリルアミドゲルを用いてSDS電気泳動を行い、泳動後はクマシーブリリアントブルー（CBB）で染色した。糖質量の測定はフェノール硫酸法、蛋白質量の測定はローリー法または280nmの吸光度によった。癌細胞増殖抑制試験は、ヒトリンパ球系癌細胞U937を各段階の精製物で時間依存的に処理し、細胞数を顕微鏡下で測定することにより非処理コントロール群との比較から癌細胞増殖抑制効果を観察した。<BR><B>結果</B>第１段階の精製はセルラーゼ処理、第２段階はセファデックスG‐75カラムクロマトグラフィー、第３段階はセファデックスG‐75カラムクロマトグラフィーの２番目の蛋白質ピークを減圧で濃縮しDEAE‐トヨパールカラムクロマトグラフィーにかけた。フラクションナンバー20番まではリン酸緩衝液のみで溶出、21番以降はNaClで濃度勾配をかけることにより溶出し、蛋白質ピークについてSDS電気泳動及び癌細胞増殖抑制試験を行った。どのピークも癌細胞増殖抑制効果を示したが、抗腫瘍活性の程度は異なっていた。
中嶋 加代子 외 1인 (The Japan Society of Home Economics)
<B> 목적</B> 상황버섯(<I>Phellinus linteus </I>)은 생체 조절 기능을 가지는 버섯 가공 식품으로서 시판되고 있어 혈당치 상승 억제 작용등이 보고되고 있지만 조추출액을 이용한 연구이다.조추출액은 다성분이기 때문에 어떤 성분이 효과를 보이는지 확인되지 않았다.이번에 연구자들은 단백질의 기능성에 착안하여 암세포 증식 억제성분의 부분정제를 실시한 후 항종양 활성을 조사하였다.<BR><B>방법 </B>시료는 상황버섯 균사체의 추출물 성분을 열수 추출하여 건조한 분말이다.컬럼 크로마토그래피에 의한 정제는, 츠카모토등의 마늘의 렉틴 단백질의 정제법에 준했다.전기영동은 15% 폴리아크릴아미드겔을 이용해 SDS 전기영동을 하며, 영동 후에는 곰시브릴리언트블루(CBB)로 염색하였다.당질량 측정은 페놀황산법, 단백질량 측정은 롤리법 또는 280 nm의 흡광도에 따랐다.암세포증식억제시험은인간임파구계암세포U937을각단계의정제물로시간 의존적으로처리하고세포수를현미경아래에서측정함으로써비처리컨트롤군과의비교에서암세포증식억제효과를관찰하였다.<BR><B>제1단계정제는셀룰라아제처리,제2단계는세화덱스G-75컬럼크로마토G-75컬럼크로마토그래피,제3단계에서는암크로마토그래피,프랙션 넘버 20번까지는 인산완충액만으로 용출, 21번 이후에는 NaCl로 농도 구배를 통해 용출하고 단백질 피크에 대하여 SDS 전기영동 및 암세포 증식 억제시험을 실시했다.어느 피크나 암세포 증식 억제 효과를 보였지만 항종양 활성의 정도는 달랐다.